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百瑞極——離心柱法核酸提取試劑盒

以往實驗室的核酸提取常用苯酚氯仿抽提法,但由于使用了苯酚、氯仿等試劑,毒性較大,長時間操作對人員健康有較大影響,而且核酸的回收率較低,損失量較大,由于操作體系大,不同實驗人員操作重復性差,不利于保護核酸,很難進行微量化的操作。現在為大家介紹離心柱法核酸提取試劑盒產品。



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離心柱法提取原理




離心柱法核酸提取試劑盒產品特點:


安全低毒:試劑盒基于硅膠柱純化技術,提取過程中無需使用有毒的酚、氯仿抽提。


操作簡便:30~40 min 內完成數個樣品的DNA/ RNA 提取; 


DNA提取試劑盒: 

DNA純度高:提取的基因組 DNA 片段完整、純度高,可直接用 于下游 PCR 擴增、qPCR、分子標記以及文庫構建等實驗。


RNA提取試劑盒:

高效去除基因組 DNA:采用膜過濾及 DNase I 消化,高效去除基因組 DNA; 


RNA 純度高:提取的 RNA 無雜質殘留,適用于對純度、完整性要求很高的下游實驗。

沒有蛋白和其他雜質的污染,可直接 用于 RT-PCR、Northern Blot、Poly A 純化、核酸保護和體外翻譯等實驗。




DNA提取常見問題


1.柱子出現堵塞?

1) 樣品用量過多。建議按照說明書推薦量進行提取; 

2) 樣品富含多糖多酚類物質。處理富含多糖多酚的組織,推薦用專用試劑盒; 

3) 離心溫度過低。本產品使用操作均在室溫下進行。 


2.DNA 提取得率低?

1) 樣品用量過少。建議按照說明書推薦量進行提取;

2) 樣品材料質量不好。盡量選用新鮮組織樣品,樣品采集后應液氮速凍,然后置于-80℃保存,建議 盡快提取,避免反復凍融; 

3) 樣品裂解不充分。若樣品過量則適當減少樣品量,加入 Buffer GP1 后需渦旋振蕩 1min 使其充 分混勻,可適當延長裂解時間。 


3.提取的 DNA 中有 RNA 污染? 

1) 未加入 RNase A 消化。請按照說明書要求加入 RNase A 消化; 

2) 樣品中 RNA 含量過多。可適當增加 RNase A 用量或延長消化時間。



RNA提取常見問題


1.柱子出現堵塞? 

處理方法同DNA提取常見問題Q1。


2.提取的 RNA 出現降解? 

1) 樣品用量過多。影響裂解液的裂解能力,造成 RNase 未被充分抑制,導致 RNA 降解,建議參考 說明書推薦取樣量,若要增加樣品起始量,則后續實驗中各溶液量均要按等比例增加。對于內源 RNase 含量較多的組織應減少樣品量,適當增加裂解液用量; 

2) 樣品保存不當。反復解凍會引起 RNA 降解,盡量使用新鮮樣品或者解凍次數不超過 2 次的樣品; 

3) 操作過程中引入 RNase 污染。請使用 RNase-Free 的工具、試劑和耗材; 

4) 電泳過程中發生降解。使用 RNase-Free 的 Loading Buffer、瓊脂糖和電泳緩沖液等。 


3.RNA 得率低? 

1) 樣品用量過多。樣品過量會影響裂解效果,建議按照說明書要求適量取樣; 

2) 樣品裂解不充分。請按照說明書的要求進行充分研磨、裂解; 

3) 洗脫不充分。RNase Free H2O 需直接加到膜中央,并靜置 2 min 后再離心,必要時可進行二次 洗脫以提高產量; 

4) 吸附柱有乙醇殘留。使用 Buffer PRW1 漂洗后需要開蓋晾干吸附柱中的乙醇。


4.提取的 RNA 中有 DNA 污染? 

1) 樣品用量過多。超出試劑盒規定的樣本量影響裂解液的裂解能力可能會導致基因組的污染; 

2) 次生代謝物較多。次生代謝物含量高的樣本在提取 RNA 時易出現基因組的污染; 

3) 操作過程中需要進行去除基因組 DNA 的操作,若 DNA 含量較多,可延長 DNase I 消化時間或重復消化。



核酸提取產品信息


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※ 本頁面產品僅供研究用,研究以外不可使用。

 

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北京拜爾迪生物技術有限公司

咨詢熱線:010-62960866


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